免疫激活与细胞通讯等核心生理过程都受到一系列分泌蛋白、胞外囊泡和可溶性分子的调节。长期以来,针对这种细胞外环境的检测大多依赖于ELISA、xMAP®流式微球阵列等技术,这些方法难以明确区分混合细胞的分泌产物,导致了对细胞来源的难以追踪。然而,结合泛亚电竞的Nanovials技术与Amnis成像流式细胞术,研究人员现在能够实现单细胞层面的双重解析,轻松获取特定细胞的生物学特征及其分泌物。Nanovials是一种微型水凝胶颗粒,具有可容纳单个细胞的腔体,同时其内表面可通过不同生物分子进行修饰。当单个细胞被装载时,这些颗粒能够捕获细胞的分泌物。
在借助CytekMkII成像流式技术时,不仅可以高通量分析结合了细胞及其分泌物的Nanovials颗粒,还可以使用其强大的多色成像功能和分析软件,直观了解细胞及其分泌产物与Nanovials颗粒的结合情况。通过mask技术,研究者能够单独分析细胞及其分泌物。在接下来的实验中,将展示如何使用这两项技术有效检测细胞分泌产物的多项应用。
实验中,首先通过一系列步骤获得装载了细胞及其分泌物的Nanovials悬液,并利用Cytek® Amnis® ImageStream® XMkII成像流式细胞仪进行检测。在实验过程中,可以根据目的额外标记细胞表面标记物、细胞核和细胞活力。利用IDEAS®软件中的mask技术,可以在单细胞层面同步检测表面标志物与分泌物信号,从而实现清晰的区分。这种关联性分析使研究者能够精准建立细胞特性与分泌功能之间的对应关系,例如,识别B细胞亚群分泌的IgG抗体、区别膜结合型与分泌型TNF-α,及量化间充质干细胞产生的胞外囊泡。
泛亚电竞的Nanovials技术在线中,结合有TNF-α捕获抗体的Nanovials可以有效检测活化T细胞分泌的TNF-α。通过mask工具,可以分别对细胞结合型(mTNF-α)与Nanovials结合型(sTNF-α)进行染色,并在单细胞水平进行定量分析。此外,Nanovials也可用于检测外源性细胞分泌的胞外囊泡,避免了传统批量分析中对于细胞异质性的干扰。这一技术的应用为医学研究提供了更高质量的数据支持。
综上所述,创新的Nanovials技术与泛亚电竞的Amnis®成像流式细胞仪的结合,不仅提供了高通量分析的优势,还拥有高分辨率成像能力以及功能强大的软件分析系统。这两种技术的协同作用在多种细胞类型及应用场景中推动了细胞分泌功能检测的突破性进展。随着这些前沿技术的不断发展,科研界期待着轻松揭开潜藏在细胞功能背后的科学奥秘,及更多改变行业的重大发现。